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大鼠p53上調凋亡調節因子(PUMA) ELISA試劑盒

更新時間:2019-08-16

簡要描述:

上海瑞番生物科技有限公司專業研發大鼠p53上調凋亡調節因子(PUMA) ELISA試劑盒。產品具有靈敏度高、特異性強,重復性好的特點??蓹z測生長因子、炎癥因子等,適用血清、血漿、組織、尿液等多種標本類型檢測。為充分滿足了廣大科研學者的需求我司特別推出定制ELISA試劑盒和專業免費代測兩大服務,如需了解更多可我司客服專員。

大鼠p53上調凋亡調節因子(PUMA) ELISA試劑盒詳細介紹:

 

[規格]:48T/96T

 

品牌:瑞番

 

[檢測波長]:450nm

 

[保存條件]:2-8°,六個月

 

[產品用途]:僅供科研使用

 

[檢測目的]:用于測定血清,血漿,胸腹水等相關液體標本

 

[特點]:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。

瑞番供應的種屬有:人,雞,鴨,魚,馬,兔  豬,植物等ELISA試劑盒等等

 

[標本處理]:

1.  本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。

2.  實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。

3.  若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。

4.  使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。

5.  若樣本為細胞培養上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態、細胞數量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。

6.  某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。

7.  建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。

 

[操作步驟]:

1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此

重復5次,拍干。

5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

10 分鐘.

7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

[大鼠p53上調凋亡調節因子(PUMA) ELISA試劑盒問題解答]:

若實驗效果不好,請及時對顯色結果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:

問題如下

可能原因

解決方案

1:標準曲線差?

1吸取及洗滌不充分

2移液不精準

 

1充分的吸取及洗滌

2檢查和校正移液器

2:精密度低?

1洗滌不充分

2混勻不充分和吸取試劑不足

3重復利用吸頭、容器和覆膜

加樣不精確

1充分混勻和吸取試劑

2使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜

3檢查和校正移液器

 

3:OD值低?

1溫育時間不正確

2溫育溫度不正確

3酶標記物或底物失效

4沒有加入終止液

5超出讀數時間讀數

1保證充足的溫育時間

2試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度

3通過混合酶標記物和底物,顏色應迅速顯現來檢查

4按照說明書實驗操作步驟加入終止液

5在說明書推薦的讀數時間內讀數

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