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分析ELISA試驗操作中影響結果的原因
發布時間:2019-09-26   點擊次數:694次
 
  ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。下面分析ELISA試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法。
  一、選擇試劑
  選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
  二、加樣
  可能原因:
  1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時);3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
  解決辦法:
  1)標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。2)加樣后及時放入孵箱。3)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。4)如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5)標本較多時,請分批操作。
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